加拿大開發出DNA條碼融合技術實驗效率可提高10倍
科技日報多倫多4月26日電(記者馮衛東)據最新一期《分子系統生物學》報道,加拿大研究人員開發出一種新技術,可將DNA(脫氧核糖核酸)條碼拼接在單個細胞內,以同時搜索數以百萬計蛋白質對之間的相互作用。
近年來,DNA條碼技術使科學家開展高並行試驗(許多不同類型的細胞在同一試管內進行試驗)成為可能,而新一代DNA測序技術的發展,進一步提高了對條碼計數和讀取結果的效率。
然而,可在同一試管內進行的試驗次數,卻受限于編碼的細胞類型數量。一直以來,DNA條碼都是一維的,也就是一個條碼只能做一次試驗。允許條碼在細胞內融合在一起,意味著科學家們現在可以打破這一障礙。新技術可顯著提高在單一試管內進行的實驗次數,在同等成本條件下能將效率提高10倍。
在廣泛使用的酵母雙雜交(Y2H)方法中,攜帶一個“誘餌”蛋白的酵母細胞與攜帶一個“獵物”蛋白的酵母細胞配對。對Y2H系統進行操縱後,只有“誘餌”與“獵物”蛋白黏在一起的細胞才能存活,從而使科學家可以觀察到哪些蛋白間互相關聯。在被命名為“條碼融合遺傳學—酵母雙雜交(BFG-Y2H)”的新技術中,攜帶著數千“誘餌”和“獵物”蛋白的細胞在同一培養皿中配對。
BFG-Y2H方法的新穎之處在於,通過對細胞編程,將來自“誘餌”和“獵物”細胞的DNA條碼連接在一起,形成一個“融合條碼”,然後利用新一代DNA測序方法對融合條碼進行檢測。
研究人員稱,這項研究的最終目標,是建立蛋白相互作用網路的三維視圖,而不是靜態圖。通過有效建立含有更豐富資訊的蛋白相互作用圖譜,BFG-Y2H方法可拓展研究人員對細胞工作機理的理解,並展現只在某種特定環境條件下才能發生的蛋白相互作用,從而加速對基因功能和人類疾病的理解。